蛋白表达系统是分子生物学中用于外源基因表达的技术体系,通过该体系可在宿主生物中高效合成目标蛋白质。其核心组成部分及特点如下:
一、基本组成
宿主 执行蛋白质合成的生物体,常见包括细菌(如大肠杆菌、枯草芽孢杆菌)、酵母、植物细胞或动物细胞等。不同宿主具有不同的表达效率、遗传特性及操作便利性。
外源基因
需要表达的目标蛋白质的基因序列,通常来源于基因组、cDNA或基因工程构建的重组DNA。
载体
用于携带外源基因进入宿主细胞的工具,需与宿主兼容(如质粒、病毒载体等)。
辅助成分
包括启动子、终止子、调控序列及培养基等,用于调控基因表达、优化生长条件。
二、表达方式与特点
细菌表达系统
- 特点: 操作简便、繁殖快、表达量高,适合生产重组蛋白(如抗生素抗性蛋白、酶类)。 - 应用
酵母表达系统 - 特点:
真核生物模型,可表达复杂蛋白(如分泌蛋白、重组蛋白),适合蛋白后修饰。
- 应用:药物筛选、基因功能研究。
动物/植物细胞表达系统 - 特点:
与人类生理环境更接近,适合表达具有细胞特异性或分泌到细胞外的蛋白。
- 应用:组织工程、药物递送系统。
三、核心地位与影响因素
核心地位:在基因工程中占据基础地位,是实现基因功能验证与产品开发的关键。
影响因素:宿主选择、基因优化、发酵条件等均会影响表达效率与产量。
四、应用领域
工业生产:如重组酶、抗体、疫苗等蛋白的规模化生产。
基础研究:基因功能解析、蛋白质结构与互作研究。
通过调控表达系统,可高效生产具有特定功能的蛋白质,满足医药、农业、工业等多领域需求。